浙江農(nóng)林大學(xué)"良瓜振興,益集甜途"大學(xué)生暑期實(shí)踐團(tuán)赴平山現(xiàn)代農(nóng)業(yè)基地開展農(nóng)業(yè)技術(shù)實(shí)踐活動(dòng)。團(tuán)隊(duì)成員深入田間地頭,充分發(fā)揮專業(yè)優(yōu)勢,通過實(shí)地觀測西瓜長勢、系統(tǒng)記錄生長數(shù)據(jù)。在完成病害樣本采集工作后,實(shí)踐團(tuán)于7月2日至5日期間在實(shí)驗(yàn)室順利開展了西瓜枯萎病病原鑒定工作,并取得預(yù)期成果。
團(tuán)隊(duì)成員合影
采集相關(guān)的樣本
研究團(tuán)隊(duì)采用系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法,首先對田間采集的西瓜病株樣本進(jìn)行表面消毒后接種于PDA培養(yǎng)基,48小時(shí)后觀察到典型的鐮刀菌菌落特征:白色絨毛狀菌落,邊緣呈淡紫色。通過顯微鏡觀察,團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)大型分生孢子呈鐮刀形且具有3-5個(gè)隔膜,小型分生孢子為卵圓形單細(xì)胞,并可見鏈狀排列的厚垣孢子,這些特征與鐮刀菌屬的形態(tài)特征高度吻合,初步確定為西瓜枯萎病病原。
團(tuán)隊(duì)成員進(jìn)行劃菌、涂菌操作
為獲得更精確的鑒定結(jié)果,團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步開展分子水平研究。研究人員提取病原菌DNA后,針對TEF-1α基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,電泳結(jié)果顯示清晰的700bp目標(biāo)條帶。
DNA電脈對比結(jié)果
隨后將擴(kuò)增產(chǎn)物克隆至載體并送測序,測序結(jié)果經(jīng)NCBI數(shù)據(jù)庫BLAST比對顯示,與尖孢鐮刀菌西瓜轉(zhuǎn)化型參考序列(MN170551.1)相似性高達(dá)99.8%,最終確認(rèn)病原為尖孢鐮刀菌西瓜轉(zhuǎn)化型(Fusarium oxysporum f. sp. niveum)。這項(xiàng)研究通過傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)觀察與分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法,實(shí)現(xiàn)了對西瓜枯萎病的精準(zhǔn)診斷,為制定有效防治方案提供了重要科學(xué)依據(jù)。
BLAST結(jié)果顯示
目前,研究團(tuán)隊(duì)正基于鑒定結(jié)果開展進(jìn)一步研究,包括抗病品種篩選和生物防治試驗(yàn)。團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)人表示,準(zhǔn)確的病原鑒定是病害防控的前提條件,這些研究成果將直接服務(wù)于當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)生產(chǎn),幫助農(nóng)戶有效應(yīng)對西瓜枯萎病的威脅。該研究不僅展示了現(xiàn)代生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)病害診斷中的應(yīng)用價(jià)值,也為鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略的實(shí)施提供了有力的科技支撐。
實(shí)踐團(tuán)成員表示,此次經(jīng)歷深刻體會(huì)到科技對農(nóng)業(yè)的變革力量,未來將更聚焦專業(yè)學(xué)習(xí),為鄉(xiāng)村振興注入創(chuàng)新動(dòng)能。團(tuán)隊(duì)計(jì)劃與當(dāng)?shù)剞r(nóng)技站合作,建立長期病害監(jiān)測點(diǎn),推動(dòng)科研成果落地,踐行“把論文寫在祖國大地上”的青春誓言。